Hibridom Fusion And Selection Medium (HAT) 杂交瘤细胞融合筛选培养基（HAT）

产品信息 Descrierea produsului

产品名称

Numele produsului

杂交瘤细胞融合筛选培养基(PĂLĂRIE)

Hibridom Fusion and Selection Medium (HAT)

货号 Cat.Nr

BRS-MED01

规格

Caietul de sarcini

500 ml/瓶

500 ml/sticlă

产品组分

Componente

DMEM 基础培养基:80%(体积比)

Mediu de bază DMEM: 80% (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Ser fetal bovin importat (FBS): 10% (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Mediu condiționat: 10% (v/v)

青霉素:100 单位/mL

Penicilină: 100 U/ml

链霉素:100 单位/mL

Streptomicina: 100 U/ml

次黄嘌呤(hipoxantina): 100uM

Hipoxantina: 100 uM

胸腺嘧啶核苷(Timidină): 16uM

Timidină: 16 uM

氨基蝶呤(Aminopterina): 0,4 uM

Aminopterina: 0,4 uM

其它添加物:多种细胞因子(足量)及添加剂

Alți aditivi: diverse citokine (cantitate suficientă) și suplimente

保存条件

Condiții de depozitare

-20 de grade 保存,有效期 18 个月.

A se pastra la -20 de grade. Perioada de valabilitate: 18 luni.

使用方法

Instrucțiuni de utilizare

培养基融化:

37 de grade 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置 3-5 min使其沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Dezghețarea mediului:

Dezghețați mediul într-o baie de apă la 37 de grade. Ștergeți suprafața exterioară cu 70% etanol și puneți-o într-un dulap de biosecuritate pentru utilizare.
Notă: Apariția unei cantități mici de material alb floculant după decongelare este normală. Lăsați mediul să stea timp de 3-5 minute pentru ca flocurile să se așeze pe fund, apoi colectați cu atenție supernatantul pentru utilizare.

细胞融合与接种:

使用物理(电融合)或化学(常规PEG)的方法完成细胞融合,然后使用本培养基直接重悬融合细胞,以合适的密度(电融合推荐:1E4细胞/孔-2E4 细胞/孔;PEG 融合推荐:5E4 细胞/孔-1E5 细胞/孔)和体积 (推荐:200ul 孔:200ul/坭6) 37 grade 5% CO2 培养箱静置培养.

Fuziunea celulară și însămânțarea:

Efectuați fuziunea celulară folosind metode fizice (electrofuziune) sau chimice (PEG convenționale). Resuspendați celulele topite direct în acest mediu la o densitate și un volum adecvate:

Electrofuziune: 1 × 10⁴ – 2 × 10⁴ celule/godeu

Fuziune PEG: 5 × 10⁴ – 1 × 10⁵ celule/godeu
Volumul recomandat: 200 µL/godeu într-o placă cu 96 de godeuri.
Se incubează la 37 de grade, 5% CO₂ pentru cultură.

培养液更换

融合后的第 4-8 日,根据细胞生长状态进行半换液或全换液培养;

Înlocuire medie:

În zilele 4-8 după-fuziune, efectuați înlocuirea parțială sau completă a mediului în funcție de starea de creștere a celulelor.

克隆筛选:

当孔中细胞克隆长至合适大小后进行融合孔阳筛检测;

Screening clon:

Când clonele celulare din godeuri ating o dimensiune adecvată, efectuați screening-ul pozitiv al clonelor.

注意事项

Precauții

本产品有一定毒性,仅用于杂交瘤细胞的筛选及培养,不可用于 培养活体动物,诊断或治疗药物用.

Acest produs este toxic și este destinat numai selecției și culturii celulelor hibridom. Nu trebuie utilizat pentru cultura de animale vii, în scopuri de diagnostic sau aplicații terapeutice.

本产品适用于 HGPRT 筛选系统的杂交瘤细胞的筛选培养,不适用于 TK或其它选择系统的细胞培养.本品不能用于直接培养 HGPRT 缺陷细胞 (如 NS1, SP2/0).

Acest produs este potrivit pentru selecția și cultura celulelor hibridom folosind sistemul de selecție HGPRT. Nu se aplică pentru TK sau alte sisteme de selecție. Acest mediu nu poate fi utilizat pentru cultura directă a celulelor cu deficit de HGPRT-(de exemplu, NS1, SP2/0).

本产品为无菌溶液,pH 为 7,2~7,4,取用需在无菌条件下进行.

Acest produs este o soluție sterilă cu un pH de 7,2-7,4. Toată manipularea trebuie efectuată în condiții aseptice.