Peptide de biotină

Ce sunt peptidele biotinilate?

Peptidele biotinilate sunt peptide care au fost modificate pentru a include un fragment de biotină. Această modificare profită de interacțiunea cu afinitate mare- dintre biotină și avidină sau streptavidină, care este utilizată pe scară largă în aplicații biologice și biochimice. Molecula de biotină este mică, stabilă și nu modifică semnificativ structura sau funcția peptidei, permițând în același timp captarea sau detectarea foarte eficientă prin sisteme bazate pe avidină-.

 

Modificare chimică
Biotina este introdusă în mod obișnuit printr-un reactiv NHS-biotină (N{-hidroxisuccinimidă biotină), care reacționează cu grupările aminei primare găsite la capătul N-terminal al peptidei sau resturile de lizină, formând o legătură amidă stabilă.

生物素（Biotina） 肽（Peptide）

COOH NH2

| |

+---EDC/NHS---→ 活化羧基（Activare） → 缩合（Cuplare）

↓ ↓

Biotină-CONH{-Peptida

 

Interacțiunea de afinitate
Peptida biotinilată se poate lega puternic (Kd ~10⁻¹⁵ M) de avidină sau streptavidină, făcând-o ideală pentru utilizare în teste care necesită o detectare precisă, captare sau imobilizare.

Cazuri de sinteză a peptidelor biotinilate

Secvență de peptide: Biotină-Ahx{-YXXXXXRXRRR-NH2

Lungime: 11A

Purity: >95%

M.W: 1898.32

Secvență de peptide: biotină-YXXXXXRXRRR--ERXXXDLXXXXPVXXXXPRR

Lungime: 31A

Purity: >95%

M.W: 4145.89

 

Aplicații ale peptidelor biotinilate

Peptidele biotinilate sunt instrumente versatile în cercetare și industrie, cu o gamă largă de aplicații, inclusiv:

Purificare prin afinitate

Folosit pentru purificarea partenerilor de legare, cum ar fi proteine, anticorpi sau acizi nucleici prin imobilizarea peptidei biotinilate pe bile de streptavidină.

ELISA și Western Blotting

Peptidele biotinilate acționează ca sonde pentru detectarea interacțiunilor specifice atunci când sunt cuplate cu etichete fluorescente de avidină-HRP sau avidină-.

Rezonanța plasmatică de suprafață (SPR)

Folosit pentru imobilizarea peptidelor pe cipurile biosenzorilor pentru studii de interacțiune.

Descoperirea medicamentelor

Selectarea candidaților la medicamente prin analiza legării acestora la ținte de peptide biotinilate.

Imunologie

Peptidele biotinilate sunt folosite pentru a mapa epitopii, pentru a studia interacțiunile cu antigen-anticorp și pentru a efectua teste de celule T{-.

Maparea epitopilor pentru dezvoltarea vaccinurilor

O peptidă biotinilată personalizată a fost utilizată pentru a identifica epitopii antigenici ai unei proteine ​​virale, ajutând la proiectarea unui candidat vaccin.

Studii de interacțiune cu proteine-proteine

Peptidele biotinilate imobilizate pe plăcile acoperite cu streptavidină-au permis studiul interacțiunilor ligandului receptor-, dezvăluind afinități de legare esențiale pentru dezvoltarea medicamentelor.

Optimizarea imunotestelor

Într-un test de diagnostic, peptidele biotinilate au fost folosite ca antigene pentru a îmbunătăți sensibilitatea și specificitatea ELISA pentru detectarea biomarkerilor de boală.

 

Referințe

1. Green, NM (1975).Avidină și streptavidină.Biochemical Journal, 131(3), 781-791.

2. Chaiet, L., & Wolf, FJ (1964).Proprietățile streptavidinei, o proteină care leagă biotina-produsă de Streptomyces.Arhivele de biochimie și biofizică, 106(1), 1-5.

3. Finn, FM și Titus, G. (1994).Biotinilarea proteinelor în cercetare și biotehnologie.Anal Biochem, 218(1), 1-7.